OPTIMASI FERMENTASI, PURIFIKASI, DAN BIOKONVERSI PRO-GLARGIN DALAM PRODUKSI INSULIN GLARGIN DARI Pichia pastoris UNTUK PENGOBATAN DIABETES DALAM MENDUKUNG SISTEM KESEHATAN NASIONAL

Kematian akibat diabetes di Indonesia terus meningkat, sementara ketergantungan terhadap impor insulin menunjukkan rendahnya kapasitas produksi dalam negeri. Insulin glargin merupakan insulin analog kerja panjang yang telah dikembangkan melalui ekspresi ekstraseluler menggunakan Pichia pastoris yang mengandung vektor pPICZα dengan gen
penyandi glargin. Penelitian ini bertujuan melakukan optimasi produksi dan pemurnian pro-glargin, serta memperoleh glargin aktif secara efisien melalui proses biokonversi menggunakan enzim trypsin. Optimasi dilakukan pada media fermentasi dengan penambahan Pichia Trace Mineral (PTM), serta proses pemurnian melalui kation exchange dengan variasi pH dan laju alir (flow rate). Biokonversi juga dioptimalkan melalui penyesuaian pH buffer dan pH reaksi. Hasil menunjukkan bahwa PTM meningkatkan biomassa dan
ekspresi pro-glargin, sementara kombinasi pH supernatan 3,8, pH elusi 6, dan flow rate 4,6 mL/menit menghasilkan pemurnian optimal. Biokonversi paling efektif terjadi pada pH 8,5 menggunakan buffer Tris 1 M pH 8.5, sehingga enzim trypsin dapat bekerja secara maksimal dalam kondisi
tersebut. Penelitian ini menunjukkan potensi besar dalam produksi insulin glargin rekombinan secara efisien dan dapat menjadi langkah awal kemandirian Indonesia dalam memproduksi insulin.