EKSPRESI, PURIFIKASI DAN KARAKTERISASI PROTEIN CHIMERIC L1L2 Human papillomavirus 52 PADA INANG Escherichia coli BL21 DE3 SKALA FLASK UNTUK MENDUKUNG KEMANDIRIAN PRODUKSI VAKSIN

Kanker serviks adalah pertumbuhan sel abnormal tidak terkendali pada leher rahim yang merupakan kasus terbanyak ke-2 menyerang perempuan Indonesia. Data tahun 2022 menunjukkan terdapat sekitar 660.000 kasus infeksi dan 350.000 kasus kematian di seluruh dunia akibat kanker serviks. Penyakit ini disebabkan oleh infeksi HR-HPV kelas 1 dan 2 dari genus Alphapapillomavirus onkogenik pada manusia. Tipe 16, 18 dan 52 paling banyak ditemukan di Indonesia. Tipe 52 mempunyai prevalensi paling tinggi virus onkogenik berbahaya. Pencegahan penularan penyakit dapat dilakukan melalui program vaksinasi. Produk vaksin HPV 52 belum tersedia di Indonesia. Vaksin impor berbasis protein kapsid
rekombinan L1 yang memiliki spektrum perlindungan terbatas. Protein L2 diketahui memiliki epitop yang dapat memicu respon imun sehingga vaksin berbasis protein chimeric L1L2 sangat potensial untuk memberikan spektrum perlindungan lebih luas terutama terhadap HPV 52. Tujuan penelitian ini adalah mengoptimasi produksi protein chimeric L1L2 HPV 52 rekombinan dengan sistem ekspresi Escherichia coli BL21 DE3 skala flask untuk mendukung kemandirian vaksin. Prosedur menerapkan metode deskriptif kualitatif dengan desain penelitian eksperimen. Optimasi ekspresi dengan temperatur inkubasi pasca induksi 20oC menghasilkan protein terlarut yang paling tinggi. Purifikasi paling optimal dilakukan
menggunakan wash buffer dengan imidazol 40 mM. Formulasi pemotongan SUMO belum mendapatkan hasil yang signifikan meskipun kromatografi HPLC telah menunjukkan kurva dengan satu puncak. Protein chimeric L1L2 berhasil diekspresikan menggunakan media kultur luria bertani kanamisin dan diinduksi IPTG pada fase awal eksponensial. Purifikasi protein L1L2 dilakukan dengan metode IMAC Ni-NTA yang melibatkan proses bind, wash dan elute. Karakterisasi
dilakukan menggunakan metode SDS-PAGE dan WB.

Kata kunci: HPV 52, protein chimeric L1L2